产品货号:
BTN11-4260
中文名称:
猪圆环病毒Ⅱ型PCR检测试剂盒
英文名称:
Porcine Ctrcovirus Type 2(PCV2) PCR Kit
产品规格:
50次
发货周期:
1~3天
产品价格:
询价
本产品就是根据猪圆环病毒2型保守区设计引物而开发的高灵敏荧光定量PCR产品。
猪圆环病毒(porcine circovirus,PCV)在分类学上属圆环病毒科圆环病毒属,为已知的最小的动物病毒之一。病毒粒子直径14~17nm,呈20面体对称结构,无囊膜,含有共价闭合的单股环状负链DNA,基因组大小约为1.76kb。PCV对外界理化因子的抵抗力相当强。PCV2为致病性的病毒。猪对PCV2具有较强的易感性,感染猪可自鼻液、粪便等废物中排出病毒,经口腔、呼吸道途径感染不同年龄的猪。
保存:-20℃,有效期一年。阳性对照需要单独放置,不要污染其他试剂。
一、样品DNA的制备
二、设置PCR反应(40μL体系)
三、电泳检测
相关搜索:猪圆环病毒Ⅱ型PCR检测试剂盒,猪圆环病毒2型PCR检测试剂盒,Porcine Ctrcovirus Type 2(PCV2) PCR Kit
猪圆环病毒(porcine circovirus,PCV)在分类学上属圆环病毒科圆环病毒属,为已知的最小的动物病毒之一。病毒粒子直径14~17nm,呈20面体对称结构,无囊膜,含有共价闭合的单股环状负链DNA,基因组大小约为1.76kb。PCV对外界理化因子的抵抗力相当强。PCV2为致病性的病毒。猪对PCV2具有较强的易感性,感染猪可自鼻液、粪便等废物中排出病毒,经口腔、呼吸道途径感染不同年龄的猪。
- 即开即用,用户只需要提供DNA模板。
- 引物经过精心优化,专一性强,只扩增猪圆环病毒2型,与其他病原没有交叉反应。
- 提供阳性对照,便于区分假阴性样品。
- PCR mix中含上样染料,PCR后可以直接上样电泳。
- 本试剂盒足够做40μL体系的PCR 50次,但只能用于科研。
组分 | 规格 |
PCR Magic Mix 3.0 | 1mL |
超纯水 | 1mL |
猪圆环病毒2型PCR引物混合液 | 100μL |
猪圆环病毒2型PCR阳性对照(1×108拷贝/μL) | 50μL |
保存:-20℃,有效期一年。阳性对照需要单独放置,不要污染其他试剂。
一、样品DNA的制备
- 用自选方法纯化N+2个样品的DNA,本试剂盒跟市场上大多数核酸提取试剂盒兼容。可以选用本公司柱式病毒DNA提取试剂盒,其使用手册可以从本公司网站搜索产品名称或产品编号BTN70701下载。
- 如果有N个样品,则需要做N+2个提取,包括一个样品制备阳性对照和一个样品制备阴性对照。样品制备阳性对照是在适量水(取决于试剂盒要求的样品起始量)中加10μL猪圆环病毒2型PCR阳性对照的1000倍稀释液而得,样品制备阴性对照是直接用水。提取结束后最后得到模板DNA放冰上待用。
二、设置PCR反应(40μL体系)
- 对N+2个样品,在PCR时需要增加一个PCR阳性对照和一个PCR阴性对照,故需要设置N+4个反应。在N+4个PCR管中分别加入下列成分:
成分 N+2个
样品管PCR
阴性对照PCR
阳性对照PCR Magic Mix 3.0 各20μL 20μL 20μL 猪圆环病毒2型PCR引物混合液 各2μL 2μL 2μL N+2个样品DNA模板 各18μL - - PCR阴性对照(水) - 18μL - 猪圆环病毒2型PCR阳性对照的1000倍稀释液 - - 18μL - 按下表设置PCR反应:
过程 温度 时间 预变性 95℃ 5min PCR反应
(35个循环)95℃ 30sec 58℃ 30sec 72℃ 20sec 最后延伸 72℃ 7min
三、电泳检测
- 取10~20μL PCR产物。电泳检测PCR产物。本产品提供的PCR Mix在扩增结束后可以直接上样,不需要另外再加loading buffer。PCR产物阳性对照必须有174bp大小的条带出现,阴性对照必须无任何扩增,否则实验无效。对没有扩增产物的样品,可以稀释10倍后重复PCR扩增以排除PCR抑制剂的感染。
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